超活络检测：经过链霉亲和素-生物素的亲和上台，信号强度显着提高，可检测低至飞摩尔（fmol）等级的方针分子。低布景搅扰：近红外荧光避开生物自发荧光，结合链霉亲和素的高特异性，完成“零布景”或“低布景”检测。多场景适用：兼容固定样本（如膜、切片）与活体样本，适用于从细胞到活体的多标准研讨。本钱比较高：链霉亲和素与Cy5均为高纯度试剂，符号进程需严厉质量操控，导致本钱高于传统显色法。非特异吸附：在极点条件（如高盐、低pH）下，链霉亲和素或许非特异吸附至塑料或玻璃外表，需经过封闭剂（如BSA、脱脂奶粉）预处理。符号功率验证：需经过SDS-PAGE或紫外-可见分光光度法验证Cy5与链霉亲和素的结合功率（一般要求符号度≥2 mol Cy5/mol Streptavidin）。反响条件优化：生物素-链霉亲和素结合需在温文条件（如pH 7.0-8.5、室温）下进行，防止高温或极点pH导致蛋白变性。信号淬灭防止：成像时需防止强光直射（如共聚集显微镜需用低功率激光预热），且成像后样本可短期保存（4℃避光），但长时间保存需冷冻（-20℃）。

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